IL-10 产生型耐受性树突状细胞调控抗原特异性 B 细胞应答

本文发表于 Science Advances（2025.11.21），由 Morali 等人完成，系统解析 IL-10 产生型耐受性树突状细胞（Tolerogenic DCs, DC^IL-10）如何通过直接与间接机制调控抗原特异性 B 细胞反应。研究揭示 DC^IL-10 在 T 细胞依赖（TD）与 T 细胞非依赖（TI）条件下对人源与动物模型 B 细胞反应的调控作用，并提出将其作为免疫介导疾病的细胞治疗策略的可行性

背景

B 细胞通过产生抗体、进行抗原呈递参与多种免疫反应，并在自身免疫病及移植排斥反应中具有重要致病作用。当前 B 细胞靶向治疗（如抗 CD20、CAR-T）有效但伴随广泛免疫抑制。在此背景下，选择性负调控抗原特异性 B 细胞反应成为新的治疗需求。

耐受性树突状细胞（tolDC）可诱导 T 细胞耐受，其中 IL-10 处理或 IL-10 基因修饰的 DC（DC^IL-10）在临床前研究中可诱导 Treg 或 Tr1 细胞。然而，其对 B 细胞的直接及间接调控作用仍未清晰。

本研究通过体外人源细胞体系、体内 humanized mouse 模型、以及 TI/TD 小鼠免疫模型系统性解析 DC^IL-10 对 B 细胞的双重调控作用。

结论1 建立 DCIL-10 调控 B 细胞反应的体外模型体系

通过筛选多组 TLR 激动剂 + IL-2 条件，作者确定了能诱导 naïve（CpG/IL-2） 和 memory（R848/IL-2） B 细胞处于“亚最适激活”状态的刺激体系，并证实该体系不改变 DC^IL-10 的耐受性表型。IL-10R 在两类 B 细胞上表达稳定，而外源 IL-10 仅增强 记忆 B 细胞增殖。该体系为后续分辨 DCIL-10 对不同 B 细胞亚群的调控作用奠定实验基础。

Fig1. DC^IL-10 调控 B 细胞反应的体外模型体系建立

结论2 DC^IL-10 轻度增强 naïve B 细胞增殖并诱导初级 IgG 转换，需依赖细胞接触

在无 T 细胞条件下，CpG/IL-2 联合 DC^IL-10 可增强 naïve B 细胞增殖，并推动 CD38⁺CD27⁺ 抗体分泌细胞样 B 细胞与 IgG⁺ B 细胞的产生；而 DC^GFP 或 IL-10 单独则无法诱导此分化。Transwell 阻断显示上述效应完全依赖 DCIL-10 与 B 细胞的直接接触。说明 DC^IL-10 可直接驱动 naïve B 细胞进行轻度分化，促进入门级 IgG 转换。

Fig2. DC^IL-10和 DC^GFP对受刺激的幼稚 B 细胞的影响。

结论3 DC^IL-10 与 IL-2 协同，大幅促进 记忆 B 细胞增殖、浆细胞化与IgG/ IgG1/ IgG4 分泌

在 R848/IL-2 刺激下加入 DC^IL-10，显著增强 记忆 B 细胞增殖，并强力诱导 CD38⁺CD27⁺ 抗体分泌细胞。虽然 IgG⁺ B 细胞比例下降，但培养上清中 总 IgG、IgG1 与 IgG4 大幅升高，显示 DC^IL-10 推动记忆 B 细胞快速分化为分泌型浆细胞。对照实验显示 IL-10 与 IL-2 构成核心信号轴，R848 无 IL-2 联合 DC^IL-10 无法产生同样效应，确立该调控的依赖性。

Fig3. DC^IL-10对受刺激的记忆 B 细胞的影响

结论4 DCIL-10 对 memory B 细胞的促进作用主要由分泌 IL-10 而非接触介导

Transwell 实验证明 DC^IL-10 在无接触条件下仍可增强 记忆 B 细胞增殖、促进 IgG 分泌，但 IgG4 诱导在接触条件下更强，提示部分接触贡献。加入抗 IL-10 抗体可完全逆转 DCIL-10 的促进效应，而抗 IL-6 无影响。说明 DCIL-10 通过 IL-10（主要）+ 接触信号（次要）调控 memory B 细胞分化与 IgG4 转换。

Fig4. DC ^IL-10通过 IL-10 调节记忆 B 细胞。

结论5 在存在 T 细胞的条件下，DC^IL-10 抑制记忆 B 细胞的抗原特异性应答，机制来自抑制 CD4⁺ T 细胞激活

在 R848 + CD4⁺ T 细胞体系中，DC^IL-10 明显减弱记忆 B 细胞的增殖与 IgG 分泌，相比 DC^GFP 显著降低 CD4⁺ T 细胞增殖及 CD40L 表达。TT 特异性体系进一步显示，DC^IL-10 抑制 TT-特异性 B 细胞扩增，同时削弱 TT-特异性 T 细胞活化。表明 DC^IL-10 在 T 细胞依赖性反应中通过 诱导 T 细胞低反应性（hyporesponsive） 间接抑制抗原特异性 B 细胞应答。

Fig5. DC ^IL-10通过抑制 T 细胞来调节记忆 B 细胞

结论6  人源细胞给予小鼠，DC^IL-10 体内给药可抑制人源 IgG 的二次应答

在人源化 NSG 小鼠模型中，免疫后给予自体 DC 或 DC + DC^IL-10 增强刺激。DC^IL-10 组人类 IgG 上升受抑（趋势显著，但因个体差异未达统计学），IgM 无明显影响，而脾脏 B 细胞比例正常。说明 DC^IL-10 可 在体内压制人类 B 细胞的 IgG 类抗体回忆反应，与其诱导的抑制性 T 细胞环境一致。

Fig6. DC ^IL-10降低了人源化小鼠中人 IgG 的诱导

结论7 在鼠源模型中，抗原特异性的 DCIL-10 同样抑制 IgG 诱导并阻断抗原特异性 B 细胞扩增

在抗原特异性小鼠模型中，给予 Ag-pulse 的 DC^IL-10 并不会促进 IgG⁺ B 细胞或抗原特异性 IgG 产生。结合过去作者研究，DC^IL-10 可诱导抗原特异性 Tr1 细胞，推测在体内抑制 B 细胞扩增机制来自 T 细胞辅助信号被 DC^IL-10 改变。这证明DC^IL-10 在 T 细胞依赖性途径中可强效降低特异性 B 细胞反应。

Fig7. DC ^IL-10在体内调节抗原特异性抗体的产生

研究亮点总结

双重调控：既增强 TI（无 T）条件下的 B 细胞分化，也抑制 TD 条件下的抗原特异性 B 细胞反应。分子核心为 IL-10 + IL-2 轴，DC^IL-10 分泌 IL-10，结合 IL-2 骨架信号驱动 B 细胞行为再编程。对健康免疫有选择性调节优势：增强非特异性 B 细胞代谢活性，同时抑制致病性、抗原特异性的 IgG 反应。与 Tr1 诱导相连接，可能形成更稳定的免疫耐受微环境。