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结直肠癌（CRC）的发生发展以 mTORC2 信号通路的持续激活为核心驱动，其介导的细胞增殖与迁移被视为恶性转移的关键因素，但目前针对 mTOR 催化活性的抑制剂在临床应用中仍存在耐药性或反应不一，这提示复合物内部结构稳态的调节存在尚未被发现的放大机制。SLAP 蛋白作为已知的抑癌因子在 CRC 中显著下调，且具有抑制致癌信号的潜力，但其是否以及如何通过干预 mTORC2 核心复合物的完整性来协同阻断肿瘤进展仍属未知。本文即在这一空白背景下，系统探讨 SLAP 在结直肠癌中的抑癌作用，并重点解析其通过 UBE3C 介导 mLST8 非降解性泛素化从而瓦解 mTORC2 复合物的全新分子机制。
SLAP 促进了由 UBE3C 介导的 mLST8 赖氨酸位点（K86 和 K215）的非降解性泛素化，进而破坏了 mTORC2 复合物的结构完整性，从而抑制其促癌活性。SLAP 的差异化表达决定了结直肠癌（CRC）细胞对 mTOR 催化抑制剂（mTORCi）的应答敏感性：SLAP 低表达的肿瘤细胞对 mTORCi 表现敏感，而 SLAP 高表达的细胞则可能出现悖论式激活。
结论 1：SLAP是mTORC2 的内源性抑制蛋白并下调其信号活性
研究者首先通过质谱筛选发现 SLAP 与 mTORC2 的核心组分存在物理互作。内源性免疫共沉淀实验证实 SLAP 能与 RICTOR 和 mTOR 结合。随后，在 CRC 细胞系中过表达 SLAP显著降低了 mTORC2 经典下游底物 AKT（S473）和 NDRG1（T346）的磷酸化水平，而对 mTORC1 底物影响较小。这初步证明了 SLAP 是 mTORC2 信号通路的负调控因子。
Fig1. SLAP抑癌功能由mTORC2介导
结论 2：SLAP 抑制结直肠癌的恶性表型高度依赖于 mTORC2 的存在
为了确认 SLAP 的抑癌功能是否通过 mTORC2 实现，研究者进行了功能回复实验。结果显示，敲低 SLAP 会显著增强细胞的侵袭力、迁移能力和克隆形成率；然而，当同步敲低 mTORC2 的关键组分 RICTOR 时，由 SLAP 缺失导致的促癌效应被完全逆转。这在逻辑上建立了 SLAP 发挥抑癌作用的必要条件：必须通过抑制 mTORC2 轴来实现。
Fig2. SLAP与mLST8结合介导其抑癌功能
结论 3：SLAP 通过直接靶向 mLST8 来干扰 mTORC2 复合物的组装
研究者进一步探索 SLAP 如何干扰复合物的物理结构。结构域缺失实验表明，SLAP 与 RICTOR 的结合依赖于 mLST8 作为桥梁，SLAP 直接结合的是 mLST8。功能验证显示，人为增加 mLST8 的表达水平可以拮抗 SLAP 的抑癌作用，并恢复被抑制的 mTORC2 信号。这锁定并确认了 mLST8 是 SLAP 调控整个复合物稳定性的关键分子靶点。
Fig3. SLAP通过LST8泛素化调控mTORC2组装
结论 4：SLAP 募集 UBE3C 介导 mLST8 非降解性泛素化调控复合物解体
在分子机制层面，研究揭示了 SLAP 并非通过降解蛋白质来起作用。实验证明SLAP 募集了 E3 泛素连接酶 UBE3C，进而使得 mLST8 在 K86 和 K215 位点发生泛素化修饰。关键的生物物理分析显示，这种泛素化修饰不会引起 mLST8 的蛋白酶体降解，而是通过空间位阻效应直接导致 mLST8 从 RICTOR/mTOR 复合物中脱离。复合物的“解体”最终关闭了信号传导。
Fig. SLAP与UBE3C相互作用促进LST8泛素化和mTORC2抑制
研究逻辑总结：
研究首先通过Co-IP分析确立了 SLAP 与 mTORC2 复合物的特异性结合，并证明其抑癌活性高度依赖于对该信号轴的下调作用；随后在分子水平锁定 mLST8 为其核心调控靶点，揭示了 SLAP 通过募集 E3 泛素连接酶 UBE3C 介导 mLST8 发生非降解性泛素化修饰（K86/K215位点）的独特机制。这一修饰导致了 mTORC2 复合物的物理结构解体而非蛋白降解，从而阻断了促癌信号传导。该研究不仅发现了 mTORC2 完整性的内源性调控开关，更为针对结直肠癌的精准干预提供了“破坏复合物稳定性”的全新治疗策略。
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