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细胞增殖

简要描述:细胞增殖是生物体的重要生命特征,单细胞生物以细胞分裂的方式产生新的个体,多细胞生物以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老和死亡的细胞。

  • 更新时间:2021-07-09 13:54:19
  • 访  问  量:388

详细介绍

1、CCK-8

CCK-8常应用于检测细胞的增殖能力。CCK-8试剂中含有WST–8:化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物(Formazan)。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比,用酶标仪在450nm波长处测定其吸光度值(OD值)来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。

2、平板克隆

单个细胞在体外增殖6代以上(时间约1周以上),其后代所形成的细胞群体,称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数,但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖并形成克隆。只有同时具有贴壁和增殖活力的细胞才会形成克隆。克隆形成率反映细胞的独立生存能力的强弱,用于评价细胞群体依赖性和增殖能力。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强; 二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,直接接种在培养皿中,持续一周以上,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。

3、BrdU

溴脱氧尿苷(5-溴代-2'-脱氧尿苷, BrdU) 是一种合成的核苷酸即胸苷的类似物。BrdU通常被用于检测活组织中再生的细胞。BrdU可以掺合到复制细胞中新的合成DNA中(在细胞周期S期),在DNA复制可代替胸苷。利用抗BrdU的特异性抗体便可以用于检测这个插入的化学品,从而检测出细胞是否在复制其DNA。

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