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小鼠骨髓源性巨噬细胞的种植

更新时间:2023-09-11 17:13:19       点击次数:619

1.  C57小鼠,雌性, 10周, 通过颈椎脱臼处死小鼠,浸入75%乙醇浸泡5分钟,转移到通风柜中的解剖盘中。

 

2. 打开皮肤,暴露、收集股骨,无菌状态下移除附着的肌肉和组织。

 

3. 转移股骨至预冷含双抗的PBS中浸泡,洗涤三次,冰上操作。

 

4. 切断股骨骨骺,使用3ml 种植液1ml注射器冲洗,冲洗液由棕色变成粉红色即可。

 

5. 收集冲洗液,计数 

6. 用种植液(DMEM+10%FBS+20%L929细胞上清液+1%双抗)稀释细胞, 种在310cm皿中,37度细胞培养箱中培养

 

7. 培养6天的巨噬细胞。

 

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