小鼠脾脏单细胞悬液的制备方法

1. 8周龄C57BL/6小鼠摘眼球放血。

2. 在75%的酒精中，浸泡5min。

3. 无菌状态下取脾脏。

4. 取一干净10cm大皿，放入无菌的70um滤网，将脾脏置于滤网上，加入2ml培养基。

5. 用研磨棒轻轻研磨脏器，将脾脏组织研磨成单细胞状态，直到只剩下脏器的结缔组织为止。

6. 研磨时动作应轻柔，用力过大可导致细胞死亡。

7. 弃去滤网和滤网上的结缔组织，收集平皿内的细胞悬液，400g4min离心沉淀。

8. 用PBS重悬沉淀，就可以进行后续实验。