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免疫荧光技术的具体操作步骤!你的操作正确吗?

更新时间:2022-09-08 00:00:00       点击次数:3775

       免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。以荧光抗体方法较常用。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。


操作方法:


1首先,免疫荧光法 ,是预先将荧光素标记在抗体上,再与涂片、切片上或细胞悬液中的抗原进行反应。借助于交光显微镜能够观察,是否存在相应的抗原,并确定相应的位置。用该方法来检测斑节对虾排准物所存在的包体。病毒包酒体在荧光显微镜下绿色荧光或楼红色。


2然后,免疫荧光法需要特殊设备,不易做定量分析,而且对结果判定有一定的主观性。


3反向间接血凝实验RIHA,是将特异性抗体与抗原连接到,适当处理过的哺乳动物红细胞表面。通过抗体与抗原之间的特异性结合反应介导血细胞的凝结,从而达到检测相应抗原目的的一种简便免疫学诊断技术。


4从鳞翅目昆虫建立首株细胞后,对虾组织细胞培养技术,昆虫的组织培养研究进一步活跃起来。


5发展对虾组织培养技术,不仅对深人研究对虾病毒提供了方便,而且也为对虾免疫学、遗传学、细胞工程学等方面研究提供了有利条件。

 

6最后,由于目前还没有控制对虾病毒病的有效药物,可利用组织培养筛选抗病毒药物。利用对虾组织培养,还可以制备病毒疫苗及为核酸探针检测病毒提供条件应用T CID5来测定YBV 的感染滴CIDSO病毒滴定法度,被感染组织为用96孔组织培养板培养的虾淋巴器官细胞。

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