咨询电话

15221734409

当前位置:首页   >  实验服务  >  动物感染模型 > 乙肝模型构建

乙肝模型构建

简要描述:乙肝动物模型构建:构建乙肝病毒(HBV)感染的动物模型是研究乙肝发病机制、药物筛选和疫苗评价的关键工具。由于HBV具有严格的种属特异性(主要感染人类和黑猩猩),常规实验动物(如小鼠、大鼠)不易感,因此需通过基因修饰或替代模型模拟HBV感染

  • 更新时间:2025-07-11 08:55:35
  • 访  问  量:1

详细介绍

一、HBV动物模型分类及构建方法

1. 黑猩猩模型(Chimpanzee)

  • 特点:w一能w全模拟人类HBV自然感染的模型,支持病毒完整生命周期(感染、复制、免疫应答)。

  • 局限性:伦理限制、成本高昂,目前已极少使用。

2. 树鼩模型(Tree Shrew, Tupaia belangeri

  • 特点

    • 小型灵长类动物,对HBV部分易感,可发生急性感染(病毒血症、肝损伤)。

    • 适合研究早期感染和免疫应答。

  • 构建方法

    • 通过尾静脉或肝内注射临床HBV毒株(如基因型B或C)。

    • 检测指标:血清HBsAg/HBeAg(ELISA)、HBV DNA(qPCR)、肝组织HBcAg(免疫组化)。

  • 缺点:感染率不稳定,难以形成慢性感染。

3. 乙肝动物模型构建:人源化肝脏小鼠模型(Humanized Liver Mice)

通过移植人肝细胞或造血干细胞,使小鼠具备HBV易感性:

  • 常用模型

    • uPA/SCID小鼠:表达尿j酶纤溶酶原激活剂(uPA),小鼠肝细胞凋亡后移植人肝细胞(如FRG小鼠)。

    • FRG小鼠(Fah⁻/⁻ Rag2⁻/⁻ IL2Rγ⁻/⁻):通过人肝细胞重建人肝组织。

  • 构建步骤

    1. 移植人原代肝细胞(或HepaRG细胞系)。

    2. 通过尾静脉注射HBV病毒颗粒(≥1×10⁷ IU/mouse)。

    3. 监测血清HBsAg、HBV DNA及肝内cccDNA(持续感染标志)。

  • 优势:支持HBV慢性感染和药物评价(如核苷类似物)。

  • 缺点:成本高,需专业操作(如肝细胞移植)。

4. HBV转基因小鼠(HBV-Tg Mice)(乙肝动物模型构建)

  • 原理:通过基因编辑在小鼠基因组中整合HBV全基因组或部分片段(如1.3倍HBV基因组)。

  • 常用品系:如C57BL/6J背景的HBV1.3 Tg小鼠。

  • 特点

    • 持续表达HBsAg/HBeAg,但缺乏免疫介导的肝损伤(免疫耐受)。

    • 适用于疫苗免疫机制研究或免疫激活模型(如通过腺病毒表达HBV抗原打破耐受)。

  • 局限性:非自然感染,病毒复制水平低。

5. 水动力注射模型(Hydrodynamic Injection, HDI)

  • 原理:通过尾静脉快速注射HBV质粒DNA(如pAAV-HBV1.3),利用流体压力使DNA进入肝细胞。

  • 步骤

    • 注射体积:8–10%小鼠体重的生理盐水(如2.5 mL/25g小鼠),5–8秒内完成。

    • 质粒剂量:10–50 μg HBV重组质粒。

  • 特点

    • 快速诱导HBV抗原表达(1周内出现HBsAg),适合急性感染研究。

    • 无cccDNA形成,感染持续时间短(2–4周)。

6. 替代病毒模型(如鸭乙肝病毒/土拨鼠肝炎病毒)

  • 鸭乙肝病毒(DHBV)模型

    • 使用雏鸭(1–3日龄)通过静脉接种DHBV。

    • 适用于抗病d药物初步筛选(如恩替k韦的早期研究)。

  • 土拨鼠肝炎病毒(WHV)模型

    • 土拨鼠(Marmota monax)感染WHV后可发展为慢性肝炎和肝癌,适合致癌机制研究。


二、模型选择依据

研究目标推荐模型关键指标
慢性HBV感染与免疫耐受人源化肝脏小鼠或HBV-Tg小鼠cccDNA、HBsAg持续阳性、肝纤维化
抗病d药物评价人源化小鼠/HDI模型HBV DNA下降、HBsAg清除率
疫苗免疫应答HBV-Tg小鼠或树鼩中和抗体滴度、T细胞应答(IFN-γ ELISPOT)
肝癌发生机制WHV感染土拨鼠肝组织病理、肿瘤标志物(AFP)

三、注意事项

  1. 实验设计

    • 设立空白对照、病毒对照(如注射HBV阴性血清)及治疗组。

    • 监测动物福利(如人源化小鼠易发生肝损伤)。

  2. 检测技术

    • cccDNA检测:需用特异性PCR或Southern blot。

    • 肝组织分析:H&E染色、HBcAg免疫组化、纤维化评分(Ishak评分)。

  3. 生物安全:HBV操作需在BSL-2实验室进行。


产品咨询

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 验证码:

扫码关注

邮箱:yilaibo@shyilaibo.com

地址:上海市宝山区长江南路180号长江软件园B650

版权所有© 伊莱博生物科技(上海)有限公司 All Rights Reserved    备案号:沪ICP备2021016661号-1     sitemap.xml    管理登陆    技术支持:化工仪器网    

沪公网安备 31011302006672号