眼科动物模型构建

一、常见眼科动物模型构建分类

1. 角膜疾病模型

（1）角膜损伤/溃疡模型

• 动物：大鼠（SD/Wistar）、小鼠（C57BL/6）、兔（新西兰兔）。

• 建模方法：

• 碱烧伤：用NaOH（0.1–1 M）滤纸片贴附角膜10–30秒。

• 酸烧伤：H₂SO₄或HCl处理。

• 机械刮伤：用角膜铲或针头刮除角膜上皮层（可控制深度）。

• 化学烧伤：

• 感染性角膜炎：接种细菌（如铜绿假单胞菌）或真菌（如白色念珠菌）。

• 检测指标：

• 角膜混浊评分（0–4级）、荧光s钠染色（上皮缺损面积）、组织病理（炎症细胞浸润）。

（2）干眼症模型

• 动物：小鼠、兔。

• 建模方法：

• 药物诱导：皮下注射东莨菪碱（0.5 mg/100 g，每日1次，持续7–14天）。

• 环境诱导：低湿度（≤30%）+ 气流暴露（如风扇直吹）。

• 自身免疫模型：如MRL/lpr小鼠（自发干燥综合征）。

• 检测指标：

• 泪液分泌量（Schirmer试验）、角膜荧光素染色、杯状细胞计数（结膜活检）。

2. 青光眼模型

（1）高眼压模型

• 动物：大鼠、小鼠、兔、灵长类（如猕猴）。

• 建模方法：

• 激光诱导：氩激光光凝房角（需前房注射印度墨汁增强吸收）。

• 微球注射：前房注射聚苯乙烯微球（10 μm，阻塞小梁网）。

• 激素诱导：地s米松滴y液（4–6周，适用于兔）。

• 检测指标：

• 眼压测量（Tonolab或Goldmann压平眼压计）、视网膜神经节细胞计数（Brn3a免疫染色）、视神经轴突损伤（电镜）。

（2）视神经损伤模型（模拟青光眼性视神j病变）

• 方法：

• 视神经钳夹：手术暴露并夹持视神经（大鼠常用）。

• NMDA诱导：玻璃体内注射NMDA（兴奋性毒性导致RGC死亡）。

3. 白内障模型

• 动物：大鼠、小鼠、兔。

• 建模方法：

• 亚硒s钠（Na₂SeO₃）皮下注射（新生大鼠，15 μmol/kg）。

• 糖皮质激素（地s米松）长期滴眼。

• 药物诱导：

• 紫外线诱导：UV-B照射（每日5–10分钟，持续数周）。

• 遗传模型：如αA-晶状体蛋白敲除小鼠（自发白内障）。

• 检测指标：

• 裂隙灯检查晶状体混浊分级（LOCS III标准）、晶状体透明度（光学相干断层扫描，OCT）。

4. 视网膜疾病模型

（1）糖尿病视网膜病变（DR）模型

• 动物：大鼠（STZ诱导）、小鼠（Akita或db/db基因修饰）。

• 建模方法：

• 单次腹腔注射STZ（50–65 mg/kg，监测血糖>300 mg/dL）。

• 需维持高血糖3–6个月才能出现视网膜病变。

• 链脲佐菌素（STZ）诱导：

• 氧诱导视网膜病变（OIR）：新生小鼠暴露于高氧（75% O₂，5天）后返回常氧（模拟早产儿视网膜病变）。

• 检测指标：

• 视网膜血管渗漏（荧光素血管造影）、新生血管（视网膜铺片PAS染色）、炎症因子（VEGF、IL-6 ELISA）。

（2）年龄相关性黄斑变性（AMD）模型

• 动物：小鼠（C57BL/6）、猪（小型猪）。

• 建模方法：

• 氪激光（波长647 nm）破坏Bruch膜（3–5点/眼）。

• 7天后评估CNV面积（OCT或荧光素血管造影）。

• 激光诱导脉络膜新生血管（CNV）：

• 遗传模型：如补体因子H（CFH）敲除小鼠。

（3）视网膜色素变性（RP）模型

• 动物：rd1、rd10小鼠（自发PDE6B突变）。

• 检测指标：

• 视网膜电图（ERG）振幅下降、外核层厚度（OCT）、视杆细胞凋亡（TUNEL染色）。

二、眼科动物模型构建选择要点

三、注意事项

1. 动物伦理：遵循国际实验动物护理评估协会（AAALAC）指南，减少痛苦（如使用麻醉剂：异f烷或戊巴b妥钠）。

2. 操作规范：

• 角膜操作需无菌条件，避免继发感染。

• 玻璃体注射需使用微升注射器（33G针头）。

3. 对照设计：设立假手术组（如仅做角膜刮擦无损伤）、空白对照组及阳性对照组（如已知有效药物）。

4. 长期观察：部分模型（如DR）需数月才能表型明显，需定期监测（血糖、眼压、眼底照相）。

5.