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眼科动物模型构建

简要描述:眼科动物模型构建:构建眼科动物模型是研究眼部疾病发病机制、药物疗效及手术干预效果的重要手段。根据研究目标(如角膜疾病、青光眼、白内障、视网膜病变等),需选择适合的动物物种和建模方法

  • 更新时间:2025-07-11 09:02:23
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详细介绍

一、常见眼科动物模型构建分类

1. 角膜疾病模型

(1)角膜损伤/溃疡模型

  • 动物:大鼠(SD/Wistar)、小鼠(C57BL/6)、兔(新西兰兔)。

  • 建模方法

    • 碱烧伤:用NaOH(0.1–1 M)滤纸片贴附角膜10–30秒。

    • 酸烧伤:H₂SO₄或HCl处理。

    • 机械刮伤:用角膜铲或针头刮除角膜上皮层(可控制深度)。

    • 化学烧伤

    • 感染性角膜炎:接种细菌(如铜绿假单胞菌)或真菌(如白色念珠菌)。

  • 检测指标

    • 角膜混浊评分(0–4级)、荧光s钠染色(上皮缺损面积)、组织病理(炎症细胞浸润)。

(2)干眼症模型

  • 动物:小鼠、兔。

  • 建模方法

    • 药物诱导:皮下注射东莨菪碱(0.5 mg/100 g,每日1次,持续7–14天)。

    • 环境诱导:低湿度(≤30%)+ 气流暴露(如风扇直吹)。

    • 自身免疫模型:如MRL/lpr小鼠(自发干燥综合征)。

  • 检测指标

    • 泪液分泌量(Schirmer试验)、角膜荧光素染色、杯状细胞计数(结膜活检)。


2. 青光眼模型

(1)高眼压模型

  • 动物:大鼠、小鼠、兔、灵长类(如猕猴)。

  • 建模方法

    • 激光诱导:氩激光光凝房角(需前房注射印度墨汁增强吸收)。

    • 微球注射:前房注射聚苯乙烯微球(10 μm,阻塞小梁网)。

    • 激素诱导:地s米松滴y液(4–6周,适用于兔)。

  • 检测指标

    • 眼压测量(Tonolab或Goldmann压平眼压计)、视网膜神经节细胞计数(Brn3a免疫染色)、视神经轴突损伤(电镜)。

(2)视神经损伤模型(模拟青光眼性视神j病变)

  • 方法

    • 视神经钳夹:手术暴露并夹持视神经(大鼠常用)。

    • NMDA诱导:玻璃体内注射NMDA(兴奋性毒性导致RGC死亡)。


3. 白内障模型

  • 动物:大鼠、小鼠、兔。

  • 建模方法

    • 亚硒s钠(Na₂SeO₃)皮下注射(新生大鼠,15 μmol/kg)。

    • 糖皮质激素(地s米松)长期滴眼。

    • 药物诱导

    • 紫外线诱导:UV-B照射(每日5–10分钟,持续数周)。

    • 遗传模型:如αA-晶状体蛋白敲除小鼠(自发白内障)。

  • 检测指标

    • 裂隙灯检查晶状体混浊分级(LOCS III标准)、晶状体透明度(光学相干断层扫描,OCT)。


4. 视网膜疾病模型

(1)糖尿病视网膜病变(DR)模型

  • 动物:大鼠(STZ诱导)、小鼠(Akita或db/db基因修饰)。

  • 建模方法

    • 单次腹腔注射STZ(50–65 mg/kg,监测血糖>300 mg/dL)。

    • 需维持高血糖3–6个月才能出现视网膜病变。

    • 链脲佐菌素(STZ)诱导

    • 氧诱导视网膜病变(OIR):新生小鼠暴露于高氧(75% O₂,5天)后返回常氧(模拟早产儿视网膜病变)。

  • 检测指标

    • 视网膜血管渗漏(荧光素血管造影)、新生血管(视网膜铺片PAS染色)、炎症因子(VEGF、IL-6 ELISA)。

(2)年龄相关性黄斑变性(AMD)模型

  • 动物:小鼠(C57BL/6)、猪(小型猪)。

  • 建模方法

    • 氪激光(波长647 nm)破坏Bruch膜(3–5点/眼)。

    • 7天后评估CNV面积(OCT或荧光素血管造影)。

    • 激光诱导脉络膜新生血管(CNV)

    • 遗传模型:如补体因子H(CFH)敲除小鼠。

(3)视网膜色素变性(RP)模型

  • 动物:rd1、rd10小鼠(自发PDE6B突变)。

  • 检测指标

    • 视网膜电图(ERG)振幅下降、外核层厚度(OCT)、视杆细胞凋亡(TUNEL染色)。


二、眼科动物模型构建选择要点

疾病类型推荐动物建模方法关键检测指标
角膜损伤大鼠、兔机械/化学烧伤荧光素染色、炎症评分
干眼症小鼠东莨菪碱+低湿度Schirmer试验、杯状细胞计数
青光眼大鼠、小鼠激光/微球诱导高眼压眼压、RGC计数
白内障大鼠亚硒s钠注射晶状体混浊分级(OCT)
糖尿病视网膜病变STZ大鼠、db/db小鼠STZ诱导高血糖血管渗漏、新生血管
AMDC57BL/6小鼠激光诱导CNV荧光素血管造影、VEGF表达
视网膜色素变性rd1/rd10小鼠自发突变ERG、外核层厚度

三、注意事项

  1. 动物伦理:遵循国际实验动物护理评估协会(AAALAC)指南,减少痛苦(如使用麻醉剂:异f烷或戊巴b妥钠)。

  2. 操作规范

    • 角膜操作需无菌条件,避免继发感染。

    • 玻璃体注射需使用微升注射器(33G针头)。

  3. 对照设计:设立假手术组(如仅做角膜刮擦无损伤)、空白对照组及阳性对照组(如已知有效药物)。

  4. 长期观察:部分模型(如DR)需数月才能表型明显,需定期监测(血糖、眼压、眼底照相)。



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