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小鼠模型(常用)
品系:BALB/c、C57BL/6、SKH-1无毛小鼠(便于观察皮肤病变)。
优点:成本低、操作方便;可模拟急性感染和潜伏感染。
局限性:小鼠对HSV-1的天然抵抗力较强,需调整病毒剂量或免疫抑制。
兔模型(如新西兰白兔)
应用:眼部HSV-1感染(角膜炎模型)、潜伏感染研究。
特点:眼部和三叉神经节潜伏感染与人类更相似。
豚鼠模型
优势:可建立生殖器HSV-1感染模型,模拟皮肤-黏膜病变。
接种途径:
角膜划痕接种:模拟疱疹性角膜炎(病毒滴度通常为1×10⁵~10⁶ PFU/眼)。
鼻内/颅内接种:研究中枢神经系统感染(如脑炎)。
足垫或皮肤接种:观察局部病变和神经侵袭。
表型:
接种后3-7天出现红肿、溃疡(皮肤/角膜)、神经症状(竖毛、瘫痪)。
步骤:
物理刺激(紫外线照射、角膜划痕)。
免疫抑制(环l酰胺、地s米松)。
应激(热休克、束缚应激)。
通过角膜或皮肤接种HSV-1(如KOS或McKrae株)。
急性期后(约7-14天),病毒在三叉神经节(TG)或背根神经节(DRG)进入潜伏状态。
再激活诱导:
检测潜伏病毒:
PCR检测神经节中HSV-1基因组(如LAT基因)。
体外神经节培养后检测病毒复活。
应用:研究宿主免疫应答(如T细胞缺陷小鼠)。
例如:SCID小鼠或IFN-γ敲除小鼠,感染后症状更严重。
病毒株选择:
实验室常用株:KOS(低毒)、McKrae(高毒,易再激活)、17syn+(潜伏研究)。
病毒滴度:
小鼠角膜/皮肤:10⁵~10⁶ PFU;颅内接种:10³~10⁴ PFU(避免快速致死)。
感染监测:
临床症状评分(如眼部病变分级、皮肤损伤面积)。
病毒载量检测:qPCR(如gB基因)或噬斑试验(Plaque Assay)。
免疫组化:检测病毒抗原(如HSV-1 gD)。
组织病理:神经节炎症、神经元坏死。
生物安全:HSV-1为BSL-2病原体,需在二级生物安全柜中操作。
对照设置:
空白对照(PBS接种)、灭活病毒对照。
动物福利:
颅内或高剂量感染可能导致瘫痪/死亡,需设定人道终点。
潜伏感染验证:
需通过抗病d药物(如阿x洛韦)清除急性期病毒后再检测潜伏。
局限性:
小鼠模型难以w全模拟人类HSV-1的长期潜伏周期。
兔/豚鼠成本高且操作复杂。
改进方向:
人源化小鼠模型(移植人类神经节组织)。
基因编辑动物(如HSV-1受体转基因小鼠)。
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