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模型类型 | 适用动物 | 造模方法 | 优缺点 |
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激光诱导 | 大鼠、小鼠、兔 | - 氩激光光凝房角(需前房注射印度墨汁增强吸收) - 参数:50-100 μm光斑,0.1-0.5 s,50-100 mW | ✅ 可精确控制眼压升高幅度 ❌ 需熟练操作,可能引发炎症反应 |
微球注射 | 小鼠、大鼠 | - 前房注射聚苯乙烯微球(10 μm,5-10 μL,阻塞小梁网) - 可联合viscoelastic凝胶延长高眼压 | ✅ 操作简单,眼压稳定维持2-4周 ❌ 需定期监测眼压(Tonolab) |
激素诱导 | 兔(新西兰白兔) | - 地s米松滴y液(0.1%,每日2次,持续4-6周) | ✅ 模拟糖皮质激素性青光眼 ❌ 仅适用于兔,眼压升高较缓慢 |
模型类型 | 适用动物 | 造模方法 | 应用场景 |
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视神经钳夹 | 大鼠(SD/Wistar) | - 手术暴露视神经,用显微血管夹(压力50-70 g)夹持5-10秒 | ✅ 直接模拟轴突损伤 ❌ 需开颅操作,损伤不可逆 |
NMDA兴奋毒性 | 小鼠、大鼠 | - 玻璃体内注射NMDA(20-40 nmol/μL,2 μL)诱导RGC凋亡 | ✅ 快速诱导RGC死亡(24-72小时) ❌ 不涉及眼压升高 |
DBA/2J小鼠:自发突变导致虹膜萎s、房角关闭,眼压逐渐升高(6-12月龄)。
特点:模拟原发性闭角型青光眼,需长期观察。
Myocilin突变小鼠:过表达人突变MYOC基因(如Tyr437His),诱导小梁网功能障碍。
仪器选择:
小鼠/大鼠:TonoLab或Tono-Pen(需麻醉,如异f烷)。
兔:Goldmann压平眼压计(局部麻醉)。
测量频率:造模后每日或隔日测量,持续2-4周。
标记方法:
逆行标记:上丘注射荧光金(FluoroGold),1周后视网膜铺片计数RGC。
免疫染色:Brn3a(RGC特异性标记物)+ DAPI核染。
功能检测:
视网膜电图(ERG):评估视网膜整体功能(需排除角膜混浊影响)。
模式ERG(PERG):特异性反映RGC功能。
轴突计数:视神经横截面透射电镜(TEM)或甲苯胺蓝染色。
胶质细胞活化:GFAP免疫组化(星形胶质细胞增生标志)。
成功标准:
眼压持续升高>25 mmHg(小鼠)或>30 mmHg(大鼠)超过7天。
RGC数量减少≥30%(对照眼相比)。
对照组设计:
假手术组(仅做角膜穿刺无激光/注射)。
对侧未处理眼(自身对照)。
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
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眼压升高不稳定 | 微球阻塞不w全/激光能量不足 | 增加微球浓度或激光功率,重复操作 |
角膜混浊影响检测 | 激光/注射损伤角膜 | 使用透明角膜膏(如羟丙基甲基纤维素)保护 |
RGC标记失败 | 逆行标记时间不足 | 延长荧光金扩散时间至7-10天 |
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