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| 动物种类 | 适用场景 | 优缺点 |
|---|---|---|
| 棉鼠 | 经典模型，支持RSV高效复制，模拟人类病理特征（细支气管炎） | ✅ 高病毒载量 ❌ 需特殊饲养（无病原体环境） |
| BALB/c小鼠 | 广泛用于免疫机制研究，对RSV敏感（需幼鼠或免疫抑制处理） | ✅ 成本低、工具鼠品系多 ❌ 病毒复制有限（需高滴度接种） |
| 恒河猴 | 接近人类感染，用于疫苗临床前评价 | ✅ 生理相似性高 ❌ 伦理和成本限制 |
| 雪貂 | 研究RSV与流感共感染或气道生理变化 | ✅ 呼吸生理接近人类 ❌ 病毒适应性需验证 |
毒株选择：
实验室株（如RSV A2、Long株）或临床分离株（如RSV B/ON1）。
病毒扩增：HEp-2细胞培养，滴度≥1×10⁶ PFU/mL（空斑试验验证）。
接种途径：
麻醉动物（异f烷），垂直滴鼻（50 μL，含1×10⁵–10⁶ PFU病毒）。
幼鼠模型（<7日龄）：无需麻醉，直接滴鼻（3–5 μL）。
鼻内接种（最c用）：
气管内接种（精准下呼吸道感染）：需手术暴露气管，注射病毒液（适用于棉鼠或猴）。
病毒载量检测：
采集肺组织（感染后3–5天峰值期），匀浆后qPCR检测RSV N基因或噬斑试验。
病理评估：
肺组织H&E染色：细支气管周围炎症、上皮细胞坏死评分（0–4分）。
免疫组化：RSV F蛋白染色定位病毒分布。
免疫应答分析：
肺泡灌洗液（BALF）：细胞计数（中性粒细胞/淋巴细胞）、ELISA检测IL-6、IFN-γ等。
脾脏/淋巴结：流式细胞术分析T细胞亚群（CD4+/CD8+）。
免疫抑制预处理：
环磷x胺（100 mg/kg，腹腔注射）或抗IFNAR1抗体（阻断I型干扰素应答）。
幼鼠优先：<7日龄小鼠因免疫系统未成熟，病毒复制更显著。
高滴度病毒（≥10⁷ PFU/只）或免疫缺陷鼠（如STAT1⁻/⁻）。
继发细菌感染：RSV感染后接种肺炎链球菌（模拟临床并发症）。
攻毒实验设计：
免疫后4周接种RSV，比较肺病毒载量（疫苗组 vs 佐剂对照组）。
注意：甲醛灭活RSV疫苗可能引发Th2型免疫偏移（嗜酸性粒细胞浸润）。
生物安全：RSV操作需在BSL-2实验室进行，动物饲养需独立通风笼具（IVC）。
对照设置：
阴性对照（PBS接种）、灭活病毒对照（评估非特异性炎症）。
动态监测：
体重下降（>20%需安l死）、呼吸频率（全身体积描记法）。
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