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RNA干扰（RNA interference, RNAi）是一种由双链RNA（dsRNA）介导的转录后基因沉默现象，通过特异性降解目标mRNA实现基因表达调控。其核心机制分为以下步骤：
dsRNA切割
Dicer酶将长dsRNA或前体miRNA切割为21-23nt的小干扰RNA（siRNA），每条siRNA 3'端有2-3个突出碱基。
RISC复合物形成
siRNA双链解旋后，反义链（引导链）与Argonaute蛋白结合形成RNA诱导沉默复合物（RISC）。
靶标识别与降解
RISC通过碱基配对定位同源mRNA，在距离siRNA 3'端12个碱基处切割mRNA，导致其降解。
| 特征 | siRNA | miRNA |
|---|---|---|
| 来源 | 外源dsRNA（病毒、人工合成） | 内源pri-mRNA加工 |
| 长度 | 21-23bp | 21-25nt |
| 互补性 | wan全互补 | 不wan全互补（3'UTR结合） |
| 作用机制 | 切割mRNA | 抑制翻译或降解mRNA |
| 稳定性 | 低（易降解） | 高 |
| 脱靶率 | 较高 | 较低 |
| 导入方式 | 化学合成、转染 | 表达载体、病毒导入 |
高通量筛选：利用RNAi文库系统性沉默基因，解析基因网络。
信号通路解析：通过抑制特定基因观察下游效应，如MAPK通路研究。
癌症治疗：靶向KRAS、BRAF等癌基因，抑制肿瘤增殖（临床试验阶段）。
抗病毒疗法：抑制HBV、HCV病毒基因表达（如丙型肝炎病毒核心蛋白抑制研究）。
抗病虫害作物：通过沉默害虫关键基因（如Bt棉）提高抗性。
性状改良：调控植物激素合成基因，延长果实保鲜期。
靶点验证：快速验证新药靶标有效性，如阿尔茨海默病相关基因筛选。
RNA药物：Onpattro（siRNA药物）获批治疗转甲状腺素蛋白淀粉样变性
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