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Cre-loxP系统
组织特异性：将Cre基因连接至特定启动子（如心肌细胞αMyHC启动子），实现靶向器官敲除。
时间诱导：
CreERT系统：Cre与突变雌激素受体（ERT）融合，注射他mo昔芬（Tamoxifen）后激活重组功能。
Tet-on/off系统：通过强li霉素（DOX）调控rtTA转录因子，控制Cre表达。
起源与机制：源自P1噬菌体，由Cre重组酶和34bp的loxP位点组成。Cre酶识别loxP方向并介导DNA重组，根据loxP排列实现基因删除、反转或易位。
时空特异性控制：
替代重组系统
Flp-FRT/Dre-Rox系统：作用类似Cre-loxP，但重组效率较低，应用较少。
基础步骤：
Step 1：构建"Flox小鼠"——在目标基因关键外显子两侧插入同向loxP序列。
Step 2：选择表达Cre的工具鼠（组织特异性或诱导型）。
Step 3：杂交繁育，获得Flox/Cre双阳性小鼠，Cre表达时靶基因被切除。
诱导方法示例：
Tamoxifen诱导：75–100 mg/kg腹腔注射，连续5天（溶解于玉米油或葵花籽油）。
DOX诱导：通过饮水或饲料给予强li霉素，激活Tet系统。
解决传统敲除局限性：
避免胚胎致死（如抑癌基因PTEN全身敲除致胚胎死亡）。
研究基因在特定发育阶段或组织中的功能（如神经元、肠道上皮）。
疾病机制研究：
肾病模型：髓系特异性核因子ⅠB敲除揭示肠道炎症机制。
肿瘤学：Pten条件敲除小鼠模拟前列腺癌、胶质瘤等发病过程。
神经科学：PDGFB基因在Tamoxifen诱导后影响皮质神经元功能。
药物研发：
他mo昔芬对肠道菌群的影响评估。
靶向基因编辑验证抗癌药物敏感性。
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