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明确研究目的
确定研究目标（如病原体致病性、免疫应答、治疗评估等）。
选择适合的病原体（病毒、细菌、寄生虫、真菌等）。
选择大鼠品系和年龄
品系：SD（Sprague-Dawley）、Wistar大鼠常用；免疫研究可选LEWIS或F344等近交系。
年龄/体重：根据实验需求选择幼鼠（免疫发育）、成年鼠（标准模型）或老年鼠（衰老免疫研究）。
SPF级动物：确保无特定病原体干扰实验结果。
病原体选择与制备
确定病原体株（如流感病毒H1N1、结核分枝杆菌H37Rv等）。
测定病原体滴度（如病毒TCID50、细菌CFU），确保接种剂量准确。
根据病原体特性选择感染方式：
呼吸道感染（如流感病毒、结核杆菌）
鼻内滴注：麻醉后滴入病原体悬液。
气溶胶暴露：使用雾化装置模拟自然感染。
消化道感染（如肠道病原体）
灌胃：直接注入胃内。
口服感染：通过饲料或饮水（需控制摄入量）。
注射感染
腹腔注射（IP）：适用于全身性感染模型（如败血症）。
静脉注射（IV）：用于血液或器官靶向感染。
皮下/肌肉注射：局部感染或疫苗研究。
其他途径
创伤感染（皮肤伤口模型）、颅内注射（神经感染模型）等。
预实验确定剂量
通过梯度剂量测试，选择能引起典型症状但不致死的中等剂量（如LD50的10-50%）。
参考文献或预实验数据优化。
感染后监测
临床症状：体重、活动度、毛发状态、呼吸频率等。
病原学检测：qPCR、培养法检测组织载量（如肺、肝、脾）。
免疫指标：ELISA检测血清抗体/细胞因子，流式细胞术分析免疫细胞亚群。
病理学：解剖观察病变，HE染色分析组织损伤。
阴性对照：PBS或培养基处理的假感染组。
阳性对照：已知致病株或标准治疗药物组（如抗生素治疗组）。
空白对照：未处理健康大鼠。
生物安全
根据病原体等级（BSL-1/2/3）选择对应实验室，遵守防护规范。
废弃物需高压灭菌处理。
伦理审批
实验方案需通过动物伦理委员会审查（遵循3R原则）。
标准化操作
统一感染时间、环境条件（温度、湿度、光照周期）。
避免应激（如频繁抓取）。
数据分析
记录感染后时间点的动态变化（如病毒载量峰值、抗体产生时间）。
使用统计方法（如t检验、ANOVA）比较组间差异。
感染失败：检查病原体活性、接种剂量或操作误差。
高死亡率：降低接种剂量或调整大鼠品系（如改用免疫缺陷鼠）。
个体差异：增加样本量（每组至少6-8只）。
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