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特殊器材：24G静脉留置针（剪去针头保留软管段）
菌株处理：UPEC菌株（如UTI89）在LB中培养至OD600=0.3（对数早期，粘附力更强）
小鼠预处理：
禁水4小时后腹腔注射速尿（10mg/kg）促进膀胱排空
麻醉后使用温生理盐水冲洗尿道口
将50μL菌悬液（含1%台盼蓝染色验证）吸入PE-10导管
45度角插入尿道，遇到阻力后回抽0.5cm（确保进入膀胱）
缓慢推注后立即：
垂直提起小鼠尾部保持30秒
轻压腹部3次促进细菌分布
早期定植：2h后处死检测膀胱细菌量（应＞10^4 CFU）
炎症峰值：24h尿液中白细胞数可达正常值20倍
慢性感染：72h后可见膀胱上皮内细菌群落（IBCs）
接种lux标记菌株（如UTI89-lux）
使用IVIS系统动态监测感染进展（需提前脱毛）
术前24h膀胱内灌注0.1M盐酸损伤黏膜
接种后2h膀胱灌注D-甘露糖（竞争性抑制细菌清除）
导管选择对比表：
| 导管类型 | 适用情况 | 穿孔风险 |
|---------|----------|----------|
| 24G留置针 | 常规模型 | 5-8% |
| PE-10管 | 慢性模型 | ＜3% |
| 34G微针 | 幼鼠实验 | 近乎0 |
菌液配制要点：
使用PBS+0.1%明胶作为悬浮剂
接种前37℃预热避免膀胱痉挛
术后护理创新：
在饮水中添加5%葡萄糖（促进细菌增殖）
使用代谢笼分时段收集尿液
超声显微成像：
使用Vevo 3100系统监测膀胱壁增厚（分辨率达30μm）
微流控芯片检测：
取10μL尿液直接检测ATP含量（与细菌量正相关）
三维病理重建：
膀胱连续切片免疫荧光染色后数字化重构
问题1：接种后尿液反流
方案：采用"三指压迫法"（同时按压耻骨联合和双侧腹股沟）
问题2：感染率不稳定
方案：在菌液中添加0.01%粘液素（增强定植）
问题3：继发肾感染
方案：接种后立即膀胱灌注2%利多ka因（抑制输尿管蠕动）
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