带状疱疹动物模型构建

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更新时间：2025-06-24 15:39:12
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一、带状疱疹动物模型构建实验动物选择

1. 常用动物及特点

动物模型	优点	缺点	适用研究
豚鼠（Guinea Pig）	对VZV敏感，可潜伏感染	症状较轻，不易自发再激活	潜伏感染模型
恒河猴（Rhesus Macaque）	接近人类VZV感染	成本高、伦理限制	疫苗/抗病du药评估
人源化小鼠（huNSG）	可感染人VZV	免疫系统不完整	病毒-宿主互作研究
大鼠（Rat）	可诱导神经痛	不自然感染VZV	带状疱疹后神经痛（PHN）模型

2. 选择依据

研究潜伏感染 → 豚鼠或 恒河猴
研究神经痛 → 大鼠（非感染模型）
研究免疫逃逸 → 人源化小鼠

二、带状疱疹动物模型构建病毒株准备

1. 常用VZV毒株

临床分离株（如Oka株、Ellen株）
实验室适应株（如VZV-32、pOka）
重组荧光报告病毒（如VZV-ORF66-GFP）

2. 病毒扩增与滴定

细胞培养：

使用 人胚胎成纤维细胞（HEF） 或 MeWo细胞扩增VZV。
37℃培养，观察CPE（合胞体形成）。

病毒纯化：超声破碎感染细胞释放病毒。
病毒滴度测定：

噬斑试验（PFU/mL）
qPCR检测病毒DNA拷贝数

三、感染途径与剂量

1. 感染方式

途径	方法	适用模型	特点
皮下接种	足垫或背部注射	豚鼠、恒河猴	模拟原发感染
鼻腔接种	滴鼻感染	人源化小鼠	呼吸道感染
神经节直接注射	脊柱旁或三叉神经节注射	大鼠（非VZV模型）	模拟神经痛

2. 感染剂量

豚鼠：10⁴–10⁵ PFU（皮下）
恒河猴：10⁶ PFU（静脉/气管）
人源化小鼠：10³–10⁴ PFU（鼻腔）

四、模型评估指标

1. 病毒感染与复制

病毒载量检测（qPCR检测VZV DNA）

背根神经节（DRG）、肺、脾组织

病毒抗原检测（免疫组化/免疫荧光）

2. 潜伏感染与再激活

潜伏期检测：

原位杂交检测VZV潜伏相关转录本（如ORF63）

再激活诱导：

免疫抑制（如环lin酰胺）
紫外线照射（模拟应激）

3. 神jing病理学与疼痛行为

组织病理：

DRG炎症、神经元损伤（HE染色）

疼痛评估（大鼠PHN模型）：

机械痛觉过敏（Von Frey纤维）
热痛觉过敏（Hargreaves试验）

4. 免疫应答

体液免疫：ELISA检测VZV IgG
细胞免疫：

IFN-γ ELISPOT（VZV特异性T细胞）
流式检测CD4⁺/CD8⁺ T细胞

五、注意事项

1. 生物安全

VZV需在 BSL-2 实验室操作，恒河猴实验需 BSL-3（若用高剂量）。

2. 动物福利

设置 人道终点（如体重下降>20%、严重神经症状）。
疼痛模型需伦理审批（如大鼠PHN实验）。

3. 对照设置

阴性对照：未感染/PBS组
阳性对照：已知致病株（如Oka株）

六、常见问题与优化

1. 豚鼠模型潜伏但不自发再激活

解决方案：

免疫抑制（如泼ni松龙）
神经损伤（坐骨神经结扎）

2. 人源化小鼠感染效率低

优化方案：

提高感染剂量（10⁵ PFU）
使用 人CD34+造血干细胞重建小鼠

3. 大鼠PHN模型不涉及VZV

替代方案：

HSV-1感染模型（部分模拟VZV神经痛）
脊神经结扎（SNL）（纯机械痛模型）

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