一、肾小球肾炎模型背景简介
采用本方法制备的大鼠同种免疫性抗肾小球基膜肾炎,其致病机制是基于当动物受到自体抗肾抗体或自体抗原抗体复合物刺激后,可引起机体肾小球基膜产生免疫反应,造成肾脏组织内肾小球基膜出现免疫损伤,最终形成肾炎。
二、肾小球肾炎模型简介
模型制作过程中由于大鼠是主动免疫,主动地产生抗肾组织抗体,故又可将此类肾炎称之为主动型海曼(Heymann)肾炎(active Heymann nephritis, AHN)。目前已报道的主动型海曼肾炎模型较多,且都具有模型病变稳定,造模周期短,具有广泛的实用性等特点。但在造模用的同种动物抗原物质制备,抗原注射剂量、注射时间及次数则略有差异。
三、肾小球肾炎模型构建方法
3.1实验动物
SD大鼠,8周龄
3.2实验材料
缝合线
3.3模型构建流程
体重180~200g SD大鼠,造模前先测定其24h尿蛋白总量,并采血测血清Cr、BUN浓度。经大鼠腹腔注射预先制备的同种大鼠肾皮质加弗氏完全佐剂乳液(体重为150~180g SD大鼠,按30mg/kg剂量经腹腔注射戊ba比妥钠麻醉,常规消毒腹部皮肤并去毛,沿腹中线作正中切口,无菌手术操作进腹,暴露肾脏,用丝线结扎肾动脉,自结扎处向肾脏插管,剪断肾静脉,经插管用生理盐水反复冲洗肾脏至白色,切除肾脏,取肾皮质用电动匀浆器在冰浴中磨成匀浆,分装后密封于-10℃冷冻保存。每次临用时取皮质匀浆25g,加弗氏完全佐剂至50ml,吸乳钵中研匀,缓缓加入生理盐水100ml边加边研磨,使乳化完全均匀),每次2ml/只,每周注射1次(造模14周共注射7次),于造模8周开始每两周同法收集尿液,进行24h尿蛋白定量,并称体重以调整注射肾皮质的量。造模14周时除收集模型动物尿液测24h尿蛋白量外,采血作血清Cr、BUN、ALB、 Hb与T-CHO测定。取肾脏组织作透射电镜标本,电镜下观察。
三、模型验证
取肾脏组织作透射电镜标本,电镜下观察