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| 对比项 | CDX模型 | PDX模型 |
|---|---|---|
| 细胞来源 | 肿瘤细胞系（如A549、HCT116） | 患者新鲜肿瘤组织 |
| 构建周期 | 2–6周 | 3–12个月 |
| 成本 | 低 | 高 |
| 应用场景 | 药物筛选、机制研究 | 个体化治疗、临床转化研究 |
细胞系选择：
肺癌：A549（非小细胞肺癌）、H1975（EGFR突变）
结直肠癌：HCT116、SW480
乳腺癌：MCF-7（ER+）、MDA-MB-231（三阴性）
常用细胞系（示例）：
需定期STR鉴定，避免交叉污染。
细胞培养：
使用含10% FBS的培养基（如DMEM/RPMI-1640），传代至对数生长期。
胰m消化后计数，调整细胞浓度（通常1×10⁶–5×10⁶ cells/mL）。
免疫缺陷鼠：
裸鼠（BALB/c nude）：T细胞缺陷，适合大多数实体瘤。
NSG（NOD-scid IL2Rγ⁻/⁻）：高度免疫缺陷，适合低成瘤性细胞。
饲养环境：SPF级屏障系统，避免感染。
步骤：
麻醉小鼠（异f烷或腹腔注射戊巴b妥钠）。
背部或侧腹皮肤消毒（酒精+碘伏）。
皮下注射肿瘤细胞悬液（100–200 μL，含1×10⁶–5×10⁶ cells）。
观察注射部位是否形成明显皮丘（避免漏液）。
优点：操作简单，易于监测肿瘤体积。
示例：
肝癌：脾脏注射（细胞迁移至肝）。
肺癌：气管内注射或尾静脉注射（肺转移模型）。
乳腺癌：乳腺脂肪垫注射（4号乳头周围）。
优点：更接近临床病理特征，但手术难度较高。
注射1×10⁵–1×10⁶ cells（100 μL PBS），4–6周后解剖检测肺/肝转移灶。
肿瘤体积测量：
游标卡尺测量长径（L）和短径（W），按公式计算：
每周测量2–3次，体积达1000–1500 mm³时需终止实验（伦理限制）。
终点指标：
肿瘤重量：解剖后称重。
组织学分析：H&E染色、Ki-67（增殖）、TUNEL（凋亡）。
分子检测：qPCR/WB检测靶基因表达。
分组设计：对照组（PBS）、实验组（化疗药/靶向药）。
评价指标：抑瘤率（）、生存期。
构建稳定敲除/过表达细胞系（如CRISPR-Cas9），比较成瘤能力差异。
共移植人PBMC或免疫检查点抑制剂（如抗PD-1抗体）。
| 问题 | 可能原因 | 解决方案 |
|---|---|---|
| 肿瘤不成瘤 | 细胞活性低/接种量不足 | 提高细胞数（5×10⁶ cells），改用NSG小鼠 |
| 肿瘤生长不均匀 | 注射技术不稳定 | 统一由同一操作者注射，避免气泡 |
| 动物死亡或感染 | 手术创伤/无菌操作不当 | 术后抗生素预防（如恩n沙星） |
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